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本制品可以对同一张膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下，将用过的膜浸泡在抗体去除液中30～60分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验，因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测。适宜从少量样品多次检测多种不同蛋白质。采用这方法多次检测同一张膜上的蛋白，能省去蛋白电泳和膜转移等费时费力的步骤。

• 有许多因素影响抗体从膜洗脱，如膜类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性。因此需要优化抗体去除液中孵育膜的时间。
  
• 确定膜上抗体是否去除与优化抗体去除液孵育膜的时间：用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟，然后进行X光胶片曝光并显影，可确定膜上的抗体是否完全去除。如胶片上显示条带，表明抗体未完全去除，应继续将膜浸泡在抗体去除液中另外孵育30～60分钟。然后再次ECL检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间。
  
• 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被去除下来。因此准备进行再生的膜，应该使用脱脂奶粉而不是BSA封闭。
  
• 尽量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗体很难被去除干净。
  
• PVDF膜上使用的效果好于硝酸纤维素膜。
  
• 使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。

• 将膜充分浸泡于适当体积的抗体去除液中，室温孵育15～30分钟并不时晃动。孵育时间的长短应根据实验条件进行优化。洗脱某些抗体需要较长的时间如30～60分钟。
  
• 用镊子取出膜，用自备Western洗涤缓冲液快速淋洗膜一次，然后用TBST洗膜3次，每次10分钟。
  
• 此时膜上抗体已去除膜已经再生。用脱脂奶粉或BSA封闭一小时，进行下一轮Western Blot实验。